ALAT-ALAT DALAM LABORATORIUM MIKROBIOLOGI
Alat untuk penjagaan suhu dan penyimpan
Inkubator (Incubator)
Inkubator
adalah alat untuk menginkubasi atau memeram mikroba pada suhu yang terkontrol
(umumnya diatas suhu ambient). Alat ini dilengkapi dengan pengatur suhu, dan
pengatur waktu. Semakin kecil ukuran inkubator maka semakin rentan pula
perubahan suhunya saat pintu inkubator dibuka. Perlu dipertimbangkan pula
keseragaman suhu yang ada didalam dengan memperhatikan pola penempatan elemen
pemanas atau terdapatnya kipas penyebar suhu. Pintu kaca yang terdapat pada
beberapa model dibiarkan tertutup saat melihat biakan secara sekilas supaya
tidak terjadi penurunan suhu.
Tipe lain inkubator berdasarkan
kegunaannya secara khusus menurut Collins et al. (2004) adalah
-Shaker incubator; inkubator yang dilengkapi dengan pengocok untuk aerasi
biakan.
-Cooled incubator; inkubator untuk suhu inkubasi dibawah
suhu ambient.
-CO2 incubator; inkubator
yang mampu menyediakan keadaan kaya karbondioksida.
-Automatic temperature change incubator;
inkubator yang dilengkapi dengan pengatur perubahan suhu otomatis
sehingga tidak perlu memindahkan kultur ke inkubator lain saat
membutuhkan perubahan suhu secara bertahap.
-Portable incubator; inkubator jinjing atau mudah dibawa yang
umumnya diaplikasikan untuk mikrobiologi lingkungan.
-Incubator room; suatu ruangan yang diubah menjadi inkubator
sesuai dengan keperluan dan syarat mikrobiologisnya.
Waterbath
Fungsi waterbath cukup
beragam dalam lab mikrobiologi, salah satunya adalah untuk inkubasi dalam waktu
singkat seperti perlakuan suhu panas (heat shock), reaksi aglutinasi,
thawing sampel beku secara cepat (suhu 45°C tidak lebih dari 15 menit), menjaga
media agar tetap cair sebelum dituang, dll. Keunggulan waterbath dibandingkan
dengan inkubator adalah waterbath lebih cepat mencapai temperatur yang
diinginkan dan tidak cepat kehilangan panas karena mempergunakan air dalam
distribusi suhu. Selain elemen pemanas beberapa tipe juga dilengkapi dengan
pencipta arus untuk menjaga suhu tetap seragam. Lebih baik menggunakan akuades
untuk mencegah kerak yang ditimbulkan saat mempergunakan suhu panas. Tutup waterbath
dapat mencegah evaporasi yang berlebihan ketika tercapai suhu tinggi, selain
itu dapat juga memanfaatkan suatu benda untuk menutupi permukaan air yang panas
misalnya bola-bola pingpong mampu mengurangi evaporasi dengan memperkecil luas
permukaan air yang kontak dengan udara.
Refrigerator
Refrigerator digunakan untuk
menyimpan benda yang membutuhkan suhu dingin dalam penyimpanannya (2-80C).
Aplikasi dalam mikrobiologi diantaranya adalah untuk menyimpan sampel
sementara, thawing sampel beku (sampel beku dicairkan secara bertahap pada suhu
2-8°C selama 18 jam (Maturin dan Peeler, 2001)), menyimpan media pertumbuhan,
menyimpan kultur, menyimpan larutan, dll. fungsi utama refrigerator
adalah menghambat atau memperlambat pertumbuhan mikroorganisme sehingga bahan
memiliki daya simpan yang lebih lama.
Freezer
Freezer umumnya memiliki suhu 0 sampai -200C. Suhu beku
berfungsi untuk menyimpan bahan yang akan rusak jika dibiarkan dalam keadaan
tidak beku, seperti reagen, enzim, faktor pertumbuhan atau larutan tertentu.
Sampel yang akan dianalisa jangan disimpan dalam freezer karena tidak semua
mikroorganisme dapat bertahan dalam temperatur beku.
Sample container
Setelah pengambilan sampel dilakukan
maka diperlukan suatu wadah penyimpan botol sampel yang dapat menjaga jumlah
dan jenis mikroorganisme saat transportasi sampel oleh karena itu sample
container atau ice box diperlukan. Sample container umumnya
dirancang untuk menjaga suhu dingin maka dari itu terdapat sekat/isolator suhu.
Suhu dingin dibuat dengan memasukkan es ke dalam sample container.
Rak tabung reaksi
Berguna untuk meletakkan atau
menyimpan tabung reaksi sehingga mudah diorganisir. Rak tabung reaksi sebaiknya
terbuat dari polypropylene sehingga dapat diautoklaf dan mengurangi
resiko pecah. Lebih baik hindari rak tabung reaksi yang terbuat dari kayu
karena dikhawatirkan dalam keadaan lembab kayu akan ditumbuhi jamur.
Desikator
Di dalam lab mikrobiologi desikator
biasanya digunakan untuk menjaga suatu bahan tetap kering seperti menyimpan
media pertumbuhan yang sangat higroskopis atau reagen tertentu. Uap air yang
berada dalam kontainer desikator akan diserap oleh desiccant yang akan
berubah warnanya (dari biru menjadi pink) jika telah jenuh dengan air.
Alat observasi dan penghitung
Mikroskop cahaya
Mikroskop adalah alat berlensa yang
digunakan untuk melihat objek kecil yang sukar dibedakan jika dilihat dengan
mata telanjang. Mikroskop memiliki banyak jenis dan fungsinya, tetapi jenis
mikroskop yang paling umum digunakan adalah mikroskop cahaya. Pada umumnya mata
tidak mampu membedakan benda dengan diameter lebih kecil dari 0,1 mm maka jika
ingin melihat morfologi sel mikroorganisme diperlukan bantuan mikroskop.
Mikroskop cahaya umumnya memiliki perbesaran dari 40x sampai 1000x sehingga
sesuai untuk melihat morfologi sel mikroorganisme.
Mikroskop stereo
Mikroskop ini berfungsi untuk melihat objek yang membutuhkan perbesaran
tidak terlalu besar. Di Laboratorium Mikrobiologi, mikroskop stereo biasanya
digunakan untuk menghitung atau mengamati
secara detail bentuk koloni bakteri
atau jamur yang tumbuh pada cawan petri.
Perbesaran maksimal yang mampu dilihat adalah 40x.
(informasi lebih lengkap mengenai
cara penggunaan mikroskop, jenis-jenis mikroskop dan aplikasinya, dapat dilihat
pada Morfologi Mikroorganisme)
Object
glass / glass slide dan Cover
glass
Ulasan spesimen padat atau cair yang
akan dilihat dengan mikroskop ditempatkan ke permukaan object glass
kemudian dilapisi (ditutup) dengan cover glass supaya melindungi lensa
mikroskop dari spesimen. Object glass umumnya dijual dalam box berisi
100 slides dan sebaiknya sekali pakai langsung dibuang tidak dicuci lagi. Cover
glass umumnya memiliki luas 16 mm2 dengan ketebalan Grade No.1. Cover
glass yang terbuat dari plastik juga tersedia di pasaran.
UV Cabinet
Pada suatu uji mikrobiologi tertentu
yang menghasilkan suatu zat yang hanya berpendar jika dikenai sinar UV pada
koloni atau disekitar koloni suatu bakteri tidak dapat dilihat dengan mata
telanjang oleh karena itu dibutuhkan UV cabinet untuk melihat
perpendaran tersebut.
Colony
counter
Alat ini berguna untuk mempermudah
perhitungan koloni yang tumbuh setelah diinkubasi di dalam cawan karena adanya kaca
pembesar. Selain itu alat tersebut dilengkapi dengan skala/ kuadran dan latar
belakang bercahaya yang sangat berguna untuk pengamatan pertumbuhan koloni
sangat banyak. Jumlah koloni pada cawan Petri dapat ditandai dan dihitung
otomatis yang dapat di-reset. Selain itu terdapat colony counter
berbentuk seperti pulpen dengan ujung pulpen dilengkapi dengan sensor sehingga
penekanan terhadap perhitungan koloni selain menandai koloni dengan tinta
sekaligus juga menghitung otomatis setiap penekanan pada cawan.
Alat-alat lain
Disc
dispenser
Disc dispenser adalah alat untuk meletakkan kertas cakram (paper disc)
berisi antibiotik ke permukaan media agar pada metode disc diffusion.
Jika peletakan paper disc pada media dapat diletakkan satru persatu
menggunakan pipet maka alat ini mempermudah pekerjaan tersebut dengan
menyebarkan beberapa paper disc dalam sekali tekan pada satu cawan
petri.
Freeze-drying
Alat ini dipakai untuk mempreservasi
/ mengawetkan kultur mikroorganisme. Prinsip yang digunakan untuk mengawetkan
sel adalah dengan membekukan dan mengeringkan dengan penguapan dibawah keadaan
vakum yang dinamakan liofilisasi (lyophilization).
Anaerobic
jars
Anaerobic jars adalah suatu wadah berpenutup kedap udara yang digunakan
untuk kultivasi mikroorganisme anaerob. Anaerobic jars dapat terbuat
dari metal atau polikarbonat transparan dan pada beberapa tipe dilengkapi
dengan pengukur tekanan. Pemeraman mikroorganisme anaerob dilakukan dengan
meletakkan cawan petri di dalam anaerobic jar dan ditambah dengan
katalisator pembentuk keadaan anaerobik. Cawan dalam alat ini diletakkan dalam
keadaan tidak dibalik karena terkadang tekanan yang turun karena keadaan
anaerob dapat menumpahkan media agar ke tutup cawan. (informasi lebih lengkap
mengenai teknik pembiakan bakteri anaerob dapat dilihat pada bagian Isolasi
Mikroorganisme).
Centrifuge
Centrifuge dalam mikrobiologi digunakan untuk mengendapkan atau
memekatkan sel mikroorganisme sehingga dapat dipisahkan antara medium
(supernatan) dan selnya yang mengendap (natan). Centrifuge modern
umumnya dapat mencapai daya sentrifugasi 3000g yang merupakan kekuatan yang
cukup untuk mendepositkan bekteri dalam waktu yang tidak terlalu lama. Menurut
Collins et al. (2004), untuk keperluan mikrobiologis seperti fungsi
diatas, dapat digunakan centrifuge dengan kecepatan maksimum 4000 rpm
yang dapat menampung 15-50 ml kultur. Sebaiknya dipilih tabung centrifuge
yang memiliki tutup berulir. Centrifuge dengan swing-out head
(tabung centrifuge yang dapat berayun) lebih aman dibandingkan dengan angle
head (dudukan tabung miring) karena menekan terbentuknya aerosol jika
menggunakan tabung yang tidak bertutup.
Spektrofotometer
Kekeruhan suatu kultur
mikroorganisme dapat diukur menggunakan alat ini. Pengukuran kekeruhan (optical
density) digunakan untuk menggambarkan jumlah bakteri pada suatu kultur cair.
Spektrofotometer dapat membaca kekeruhan kultur dengan melewatkan suatu berkas
cahaya kemudian persentase cahaya yang melewatinya dihitung. Semakin keruh
berarti cahaya yang diterima semakin sedikit. Aplikasi dalam mikrobiologi
diantaranya untuk menghitung optical density pada saat men grafik pertumbuhan
suatu bakteri.
(informasi lebih lengkap mengenai
spektrofotometer dapat dilihat pada Bab menghitung mikroorganisme)
Catatan:
Beriikut adalah jenis-jenis plastik
yang dapat disterilisasi menggunakan autoklaf (autoclavable):
polypropylene, polycarbonate, nylon, PTFE (polytetrafluoroethylene
/ teflon), polyalomer, TPX (methylpenthene polymere).
Sedangkan jenis-jenis plastik yang tidak tahan disterilisasi dengan autoklaf
adalah : polyethylene, polystyrene dan rigid polyvinyl
chloride (Collins et al., 2004).
Ilustrasi alat-alat laboratorium
mikrobiologi
Dibawah ini adalah contoh alat-alat
yang telah dijelaskan diatas, disusun tidak berurutan dan tidak semua alat
ditampilkan.
0 komentar:
Posting Komentar